Angaben zur Quelle [Bearbeiten]
| Autor | Susanne Talke |
| Titel | Morphologische und molekularbiologische Untersuchungen zur Evolution der Euglenida |
| Ort | Bielefeld |
| Datum | Dezember 2000 |
| Anmerkung | Dissertation zur Erlangung des Grades einer Doktorin der Naturwissenschaften (Dr. rer. nat.) der Fakultät für Biologie der Universität Bielefeld |
| URL | http://pub.uni-bielefeld.de/publication/2301360# |
Literaturverz. |
nein |
| Fußnoten | nein |
| Fragmente | 2 |
| [1.] Bm/Fragment 035 19 - Diskussion Zuletzt bearbeitet: 2014-05-13 19:36:54 Schumann | Bm, Fragment, Gesichtet, SMWFragment, Schutzlevel sysop, Talke 2000, Verschleierung |
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| Untersuchte Arbeit: Seite: 35, Zeilen: 19-24, 27-29 |
Quelle: Talke 2000 Seite(n): 31, 32, Zeilen: 31: 11-16; 32: 9-12 |
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| Dient mRNA oder Gesamt-RNA als Ausgangsmaterial für die PCR, so muss vor der eigentlichen PCR eine Reverse Transkription (RT) durchgeführt werden. Die Reaktion wird mit der RNA-abhängigen DNA-Polymerase Reverse Transkriptase durchgeführt, wobei als Produkt eine zur eingesetzten RNA-Matrize komplementäre Einzelstrang-DNA (complementary DNA = cDNA) gebildet wird. Diese cDNA wird dann in der nachfolgenden PCR zur Doppelstrang-DNA ergänzt. [...]
Die Reverse Transkription trennt den Vorgang der RT und der PCR voneinander, dabei werden zuerst Oligo (dT)-Primer an die Poly (A)-Überhänge der mRNA angeheftet, die gesamte cDNA synthetisiert und danach das RNA-Template [denaturiert.] |
Dient mRNA oder Gesamt-RNA als Ausgangsmaterial für die PCR, so muß vor der eigentlichen PCR eine Reverse Transkription [RT] durchgeführt werden. Die Reaktion wird mit der RNA-abhängigen DNA-Polymerase Reverse Transkriptase durchgeführt, wobei als Produkt eine zur eingesetzten RNA-Matrize komplementäre Einzelstrang-DNA [complementary DNA, cDNA] gebildet wird. Diese cDNA wird dann in der nachfolgenden PCR zur Doppelstrang-DNA ergänzt.
[Seite 32] Das Reverse Transcription System (Promega, A3500) trennt im Gegensatz zum Access RTPCR System den Vorgang der Reversen Transkription und der PCR voneinander. Hier werden zuerst Oligo-(dT)-Primer an die Poly-(A)-Überhänge der mRNA angeheftet, die gesamte cDNA synthetisiert, und danach das RNA Template denaturiert. |
Ein Verweis auf die Quelle fehlt. |
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| [2.] Bm/Fragment 036 01 - Diskussion Zuletzt bearbeitet: 2014-05-13 19:43:36 Schumann | Bm, Fragment, Gesichtet, SMWFragment, Schutzlevel sysop, Talke 2000, Verschleierung |
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| Untersuchte Arbeit: Seite: 36, Zeilen: 1-3, 7-9 |
Quelle: Talke 2000 Seite(n): 32, 33, Zeilen: 32: 12-15; 33: 19-20 |
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| Erst in einer anschliessenden PCR erfolgt die Anlagerung der für den gesuchten Genabschnitt spezifischen Primer an die einzelsträngige cDNA. Als Reverse Transkriptase wurde M-MLV eingesetzt. [...] Nach der Reaktion wurden 175 μl nukleasefreies H2O in den Ansatz pipettiert, dieser aliquotiert und die Aliquots bis zur Verwendung in einer PCR bei –20°C eingefroren. | Erst in einer anschließenden PCR erfolgt die Anlagerung der für den gesuchten Genabschnitt spezifischen Primer an die einzelsträngige cDNA. Als Reverse Transkriptase wurde AMV RT [Avian Myeloblastosis Virus] eingesetzt (GOODMAN & MACDONALD 1979).
[Seite 33] Nach der Reaktion wurden 80 µl nucleasefreies H2O in den Ansatz pipettiert, dieser aliquotiert und die Aliquots bis zur Verwendung in einer PCR bei -20°C gelagert. |
Ein Verweis auf die Quelle fehlt. Die Übernahme beginnt auf der Vorseite. |
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