Hw/030

Charakterisierung funktioneller Aminosäuren der UDP-N-Acetylglucosamin-2-Epimerase/N-Acetylmannosaminkinase

von Heinrich Wieland

vorherige Seite | zur Übersichtsseite | folgende Seite

F

Statistik und Sichtungsnachweis dieser Seite findet sich am Artikelende

[1.] Hw/Fragment 030 01 - Diskussion Zuletzt bearbeitet: 2014-08-31 12:35:46 Schumann

Blume 2003, Fragment, Gesichtet, Hw, SMWFragment, Schutzlevel sysop, Verschleierung

Typus Verschleierung

Bearbeiter Hindemith

Gesichtet

Untersuchte Arbeit: Seite: 30, Zeilen: 1ff (komplett)

Quelle: Blume 2003 Seite(n): 32, Zeilen: 32: 1ff; 33: 1-2

6.1.4.1. Bakterien Bakterien werden bei 37 °C im Schüttelinkubator (225 rpm; Novotron; Infors, Schweiz) oder im Brutschrank (Model B; Memmert, Deutschland) kultiviert. Bakterien können bei –80 °C eingefroren und so für Jahre gelagert werden. Dafür werden Kulturen bis zur Sättigung angezogen, Glycerin bis zu einer Konzentration von 20% (v/v) zugegeben und die Zellen in flüssigem Stickstoff eingefroren, bevor sie bei –80 °C gelagert werden. Eingefrorene Zellen können wieder in Kultur genommen werden, indem sie auf Eis aufgetaut werden und in Medium resuspendiert werden. LB-Medium: 10 g/l Pepton (GibcoBRL, USA) 5 g/l Hefeextrakt (GibcoBRL, USA) 10 g/l NaCl 15 g/l Agar (nur bei Festmedien) SOC-Medium: 20 g/l Pepton (GibcoBRL, USA) 5 g/l Hefeextrakt (GibcoBRL, USA) 0,5 g/l NaCl 4 g/l MgCl2 3,6 g/l Glucose 186 mg/l KCl . Nach dem Autoklavieren wird bei Selektivmedien noch 50 mg/ml Ampicillin zugegeben. 6.1.4.2. Hefen Hefezellen werden bei 30 °C im Schüttelinkubator (140 rpm; RFI-150; Infors, Schweiz) oder im Brutschrank (Heraeus, Deutschland) kultiviert. Hefen können bei –80 °C eingefroren und so für Jahre gelagert werden. Dafür werden Hefekulturen über Nacht angezogen, auf eine berechnete Zelldichte von OD600 50-100 eingestellt, Glycerin mit einer Konzentration von 15% (v/v) zugegeben und die Zellen in flüssigem Stickstoff eingefroren, bevor sie bei –80 °C gelagert werden. Eingefrorene Zellen können wieder in Kultur genommen werden, indem sie auf Eis aufgetaut werden und in Medium resuspendiert werden.

2.1.5.1 Bakterien Bakterien werden bei 37 °C im Schüttelinkubator (225 rpm; Novotron; Infors, Schweiz) oder im Brutschrank (Model B; Memmert, Deutschland) kultiviert. Bakterien können bei –80 °C eingefroren und so für Jahre gelagert werden. Dafür werden Kulturen bis zur Sättigung angezogen, Glycerin bis zu einer Konzentration von 20% (v/v) zugegeben und die Zellen in flüssigem Stickstoff eingefroren, bevor sie bei –80 °C gelagert werden. Eingefrorene Zellen können wieder in Kultur genommen werden, indem sie auf Eis aufgetaut werden und in Medium resuspendiert werden. LB-Medium: 10 g/l Pepton (GibcoBRL, USA) 5 g/l Hefeextrakt (GibcoBRL, USA) 10 g/l NaCl 15 g/l Agar (nur bei Festmedien) [...] SOC-Medium: 20 g/l Pepton (GibcoBRL, USA) 5 g/l Hefeextrakt (GibcoBRL, USA) 0,5 g/l NaCl 4 g/l MgCl2 3,6 g/l Glucose 186 mg/l KCl [...] Nach dem Autoklavieren werden bei Selektivmedien noch entsprechende Antibiotika zugegeben: [...] 50 mg/ml Ampicillin [...] 2.1.5.2 Hefen Hefezellen werden bei 30 °C im Schüttelinkubator (140 rpm; RFI-150; Infors, Schweiz) oder im Brutschrank (Heraeus, Deutschland) kultiviert. Hefen können bei –80 °C eingefroren und so für Jahre gelagert werden. Dafür werden Hefekulturen über Nacht angezogen, auf eine berechnete Zelldichte von OD600 50-100 eingestellt, Glycerin mit einer Konzentration von 15% (v/v) zugegeben und die Zellen in flüssigem Stickstoff eingefroren, bevor sie bei –80 °C gelagert werden. Eingefrorene [Seite 33] Zellen können wieder in Kultur genommen werden, indem sie auf Eis aufgetaut werden und in Medium resuspendiert werden.

Anmerkungen Ein Verweis auf die Quelle fehlt.

Sichter (Hindemith) Schumann

vorherige Seite | zur Übersichtsseite | folgende Seite
Letzte Bearbeitung dieser Seite: durch Benutzer:Schumann, Zeitstempel: 20140831123638