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| Untersuchte Arbeit: Seite: 38, Zeilen: 20-30 |
Quelle: Regn 2002 Seite(n): 69, 70, Zeilen: 69: letzter Abschnitt; 70: 1 ff. |
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| TRANSFEKTION VON DCS MIT DOTAP
Die gewonnen [sic] Poly-RNA wurde in der benötigten Menge an infektiösen Partikel mit 50 μl OptiMEM in einem 1,5ml Eppendorf -Reaktionsgefäß verdünnt. In einem zweiten 1,5ml Eppendorf-Reaktionsgefäß wurden 1.25 μg des kationischen Lipids DOTAP in 50 μl OptiMem gelöst. Anschließend wurden das Lipidgemisch vorsichtig mit einer Eppendorfpipette zu dem RNA Gemisch [sic] gegeben wurde, um Scherkräfte zu vermeiden. Durch leichtes Klopfen gegen die Wand des Reaktionsgefäßes wurde eine Vermischung beider Lösungen erzielt. Anschließend wurde das Gemisch für 15 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. In der Zwischenzeit wurden die DCs geerntet, gewaschen und mit einer Konzentration von 1x106 Zellen in 100 μl OptiMEM [eingestellt.] |
Adenovirale Transfektion von DCs mit Lipofectamin
Das Virus wurde in der benötigten Menge an infektiösen Partikel mit 50 μl OptiMEM in einem 1,5ml Eppendorf -Reaktionsgefäß verdünnt. In einem zweiten 1,5ml Eppendorf-Reaktionsgefäß wurden 1.25 μg des kationischen Lipids Lipofectamin in 50 μl OptiMem gelöst. [Seite 70] Anschließend wurden beide Lösungen miteinander vereinigt indem das Lipidgemisch vorsichtig mit einer Eppendorfpipette zu dem Virusgemisch gegeben wurde, um Scherkräfte zu vermeiden. Durch leichtes Klopfen gegen die Wand des Reaktionsgefäßes wurde eine Vermischung beider Lösungen erzielt. Anschließend wurde das Gemisch für 15 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. In der Zwischenzeit wurden die DCs geerntet, gewaschen und mit einer Konzentration von 1x106 Zellen in 100 μl OptiMEM eingestellt. |
Ein Verweis auf die Quelle fehlt. |
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